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| 阔叶十大功劳ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
| 徐 婧， 万定荣， 杨光忠* |
| 中南民族大学 药学院， 武汉 |
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| 徐 婧， 万定荣， 杨光忠* |
| 中南民族大学 药学院， 武汉 |
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摘要 采用单因子试验和正交设计方法，对影响阔叶十大功劳ISSR-PCR反应体系的引物、Taq DNA聚合酶、dNTPs、模板DNA及退火温度5个因素进行优化，为探讨阔叶十大功劳种质遗传多样性奠定基础.结果表明：阔叶十大功劳ISSR-PCR的最佳反应体系为：在20 μL反应体系中，0.5 μmol/L引物、0.5 U Taq酶、150 μmol/L dNTPs和20 ng模板DNA.在最佳反应条件下，从80条引物中筛选出15条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物，并经过9份阔叶十大功劳种质检验，证明该体系具有扩增条带清晰、稳定、重复性好等优点.综上所述，本文所建立的ISSR-PCR反应体系可用于阔叶十大功劳的种质鉴定及遗传多样性分析.
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收稿日期: 2012-02-25
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