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| 胸膜肺炎放线杆菌Δlip40回复突变株的构建及鉴定 |
| 胡雪鹤， 刘彩红， 阎 浩， 祁 超 |
| 华中师范大学 生命科学学院， 湖北省遗传与调控重点实验室， 武汉 |
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| 胡雪鹤， 刘彩红， 阎 浩， 祁 超 |
| 华中师范大学 生命科学学院， 湖北省遗传与调控重点实验室， 武汉 |
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摘要 胸膜肺炎放线杆菌(APP)可引起猪胸膜肺炎，在一定程度上阻碍了养猪业的发展.目前，APP基因组中已得到有效鉴定的基因不足10%.为建立有效的APP功能基因研究体系，本文以前期构建的血清1型APP SLW01株外膜脂蛋白基因缺失突变株Δlip40为亲本，通过电转化法将携带有完整lip40基因的穿梭质粒pJFF-lip40导入Δlip40中，通过氯霉素抗性筛选获得回复突变株CΔlip40.对CΔlip40的生物学特性进行了初步分析发现，穿梭质粒可在APP中稳定遗传，并且APP生长能力未受穿梭质粒转入的影响.此外，SLW01和Δlip40对氯霉素高度敏感，但回复突变株CΔlip40较前两种菌株对氯霉素抗性明显增强，表明穿梭质粒pJFF224-XN抗性基因可在APP菌株中稳定表达.回复突变株CΔlip40的成功构建为分析脂蛋白Lip40致病机制提供了有效对照材料，本研究中建立的互补菌株构建系统以及APP抗性评价方法将有助于今后深入研究APP生物学特性及基因功能.
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收稿日期: 2015-04-25
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