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| 鱼腥藻PCC7120染色体基因对asr0757/alr0758的表达优化及其鉴定 |
| 陈 洁， 陈思礼， 吴汇兰 |
| 中南民族大学 生命科学学院， 武汉 |
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| 陈 洁， 陈思礼， 吴汇兰 |
| 中南民族大学 生命科学学院， 武汉 |
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摘要 NCBI预测鱼腥藻PCC7120染色体上的基因对asr0757/alr0758可能构成一个毒素-抗毒素系统.为研究其是否属于毒素-抗毒素系统家族，分别构建这两个基因的表达载体.用1.0 mM IPTG诱导重组菌表达，优化表达条件，并对表达出的蛋白进行纯化与western blot检测.SDS-PAGE结果显示：asr0757与alr0758在37℃下诱导6 h后，均成功诱导表达出目的蛋白asr0757(13.5 KD)和alr0758(17.9 KD).抗毒素表达量较好，毒素alr0758表达量较少.通过设置诱导时间梯度和IPTG浓度梯度优化毒素基因表达条件，优化结果显示：毒素基因alr0758在28℃，IPTG浓度为0.4 mM，诱导10 h时有最大表达量.蛋白纯化与western blot结果证实诱导表达的蛋白为目的蛋白.
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收稿日期: 2016-02-25
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