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| 褐藻胶裂解酶基因的克隆、表达载体构建以及表达条件的研究 |
| 刘 航1,2， 曹海龙1， 岳 敏1,2， 张建平1,2， 李曙光1， 杜昱光1 |
| 1. 中国科学院 大连化学物理研究所生物技术部， 辽宁 大连； 2. 中国科学院 研究生院， 北京 |
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| 刘 航1,2， 曹海龙1， 岳 敏1,2， 张建平1,2， 李曙光1， 杜昱光1 |
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摘要 以产褐藻胶裂解酶的紫色链霉菌(Streptomyces violaceoruber)为出发菌株，应用基因工程技术，将褐藻胶裂解酶aly基因进行克隆，并构建了该基因的重组表达载体pET23b(＋)-aly.通过表达条件的初步优化，实现了aly基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中的成功表达.在IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L，诱导时间为8 h，诱导温度为16℃的条件下，细胞破壁后上清中ALY粗酶液活力为6 U/mg.根据褐藻胶裂解酶ALY的蛋白质结构预测结果推断该酶属于Alginate lyase-2家族，理论pI为8.85，理论分子量大小为28 500，化学式为C1252N1920H356O394S9.SDS-PAGE蛋白电泳检测发现，ALY蛋白的分子量约为28 000，与预测的蛋白分子量较为接近.
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收稿日期: 1900-01-01
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| 引用本文: |
刘航, 曹海龙, 岳敏, 张建平, 李曙光, 杜昱光. 褐藻胶裂解酶基因的克隆、表达载体构建以及表达条件的研究[J]. , 2012, 46(4): 0-.
刘 航1,2， 曹海龙1， 岳 敏1,2， 张建平1,2， 李曙光1， 杜昱光1. . , 2012, 46(4): 0-.
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| 链接本文: |
| http://journal.ccnu.edu.cn/zk/CN/ 或 http://journal.ccnu.edu.cn/zk/CN/Y2012/V46/I4/0 |
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